Analytické metody
Komplexní metodologické detaily o fytochemické analýze Ilex guayusa Vědecký název rostliny guayusa. První popis v roce 1901 Theodorem Loesenerem. Synonyma: Ilex guayusa var. macrophylla.Ilex guayusa
- Přehled
- Příprava vzorků
- Metody HPLC
HPLC
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie – standardní metoda kvantitativní analýzy polyfenolů a alkaloidů v Guayuse. Typická metoda: C18 kolona, acetonitrilový gradient, UV detekce při 280 nm.
Mehr Infos - Metody LC-MS/MS
LC-MS/MS
Kapalinová chromatografie spojená s tandemovou hmotnostní spektrometrií – vysoce citlivá metoda pro identifikaci a kvantifikaci sekundárních metabolitů. Používá se pro analýzu saponinů a polyfenolů v guayuse.
Mehr Infos - GC-MSpro těkavé sloučeniny
GC-MS
Kombinace plynové chromatografie a hmotnostní spektrometrie – analytická metoda pro identifikaci těkavých sloučenin. Používá se k analýze aromatických látek v Guayuse.
Mehr Infos
Tato stránka je určena pro vědce, analytiky a profesionály. Obsahuje podrobné metodologické informace o analýze složek guayusy.
Přehled analytických metod
Fytochemická charakterizace Ilex guayusa vyžaduje kombinaci různých analytických technik. Volba metody závisí na cílové sloučenině, matrici a požadované citlivosti.
| Metoda | Cílové sloučeniny | LOD | Doba analýzy | Náklady |
|---|---|---|---|---|
| HPLC-DAD | Polyfenoly, Kofein | 0,1-1 μg/mL | 30-60 min | €€ |
| HPLC-DAD-ESI/MSn | Polyfenoly (objasnění struktury) | 0,01-0,1 μg/mL | 45-90 min | €€€ |
| LC-MS/MS (QqQ) | Alkaloidy, Saponiny | 0,001-0,01 μg/mL | 15-30 min | €€€€ |
| GC-MS | Těkavé sloučeniny | 0,01-0,1 ng/mL | 30-45 min | €€€ |
| UV-Vis spektroskopie | Celkové Polyfenoly (TPC) | 1-10 μg/mL | 5-10 min | € |
| NMR | Objasnění struktury | 1-10 mg | 1-4 h | €€€€€ |
Příprava vzorků
Příprava vzorků je kritická pro reprodukovatelné a přesné výsledky. Listy guayusy obsahují vysoké koncentrace polyfenolů, které jsou citlivé na oxidaci.
Standardní protokol pro analýzu polyfenolů (García-Ruiz et al. 2017)
Materiály
- Lyofilizované listy Guayusa (mleté, <0,5 mm)
- Extrakční roztok: Methanol/Voda (70:30, v/v) + 1% Kyselina mravenčí
- 0,45 μm PVDF filtr (Millex HV13, Millipore)
- Ultrazvuková lázeň (40 kHz)
- Centrifuga (9.500 × g)
Protokol
- Vážení: 100 mg lyofilizovaného prášku v 15 mL Falconových zkumavkách
- Extrakce 1: Přidat 1 mL extrakčního roztoku, vortexovat (30 s)
- Ultrazvuk 1: 60 min při pokojové teplotě v ultrazvukovém koupeli
- Inkubační doba: Přes noc při 4°C
- Ultrazvuk 2: Znovu 60 min v ultrazvukovém koupeli
- Centrifugace: 9.500 × g, 5 min, pokojová teplota
- Filtrace: Přes filtr 0,45 μm PVDF
- Skladování: Při 4°C ve tmě, max. 48 h před analýzou
Míry obnovy
| Třídění sloučenin | Obnova (%) | RSD (%) |
|---|---|---|
| Chlorogenové kyseliny | 94,2 ± 3,1 | 3,3 |
| Flavonoly | 91,8 ± 4,2 | 4,6 |
| Katechiny | 88,5 ± 5,1 | 5,8 |
| Kofein | 98,7 ± 1,2 | 1,2 |
Extrakce karotenoidů (Stinco et al. 2016)
Protokol
- Vážení: 10 mg lyofilizovaného prášku
- Odstranění vody: 1 mL MilliQ vody, vortexovat, centrifugovat (18.000 × g, 3 min), vyřadit
- Extrakce 1: 1 mL hexanu/acetonu (1:1, v/v), vortexovat, centrifugovat (18.000 × g, 3 min)
- Extrakce 2: 500 μL hexan/aceton, vortexovat, centrifugovat
- Spojení: Spojit organické fáze
- Zpracování: Metanolový KOH (30 g/100 mL), 1 h při RT ve tmě
- Omytí: Vodou do neutrálního pH
- Odpaření: Vakuový koncentrátor, <30°C
- Rozpuštění: V 100 μL ethylacetátu
- Skladování: Pod N₂ při -20°C
Kritické faktory
- Oxidace: Polyfenoly oxidují rychle → Kyselina mravenčí jako antioxidant, skladování při 4°C ve tmě
- Světlo: Karotenoidy jsou fotolabilní → Práce při šera, jantarové sklo
- Teplota: Enzymy mohou rozkládat Polyfenoly → Lyofilizace nebo okamžitá extrakce
- pH: Ovlivňuje stabilitu a extrakci → pH 2-3 optimální pro Polyfenoly
HPLC metody
HPLC-DAD für Quantifizierung
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s detektorem diodového pole text_563 je standardní metodou pro kvantifikaci polyfenolů a kofeinu.
Zřízení zařízení (García-Ruiz et al. 2017)
- Systém: Agilent 1220 Infinity LC
- Čerpadlo: Binární gradientové čerpadlo
- Autosampler: Injekční objem 20 μL
- Kolonový pec: 30°C
- Detektor: DAD, 200-600 nm
Chromatografické podmínky
| Parametr | Hodnota |
|---|---|
| Sloupec | Luna C18 (25 cm × 4,6 mm, 5 μm, Phenomenex) |
| Předsloupec | C18, 4 × 3 mm |
| Mobilní fáze A | Voda + 0,1% kyselina mravenčí |
| Mobilní fáze B | Methanol + 0,1% mravenčí kyseliny |
| Průtoková rychlost | 1,0 mL/min |
| Objem injekce | 20 μL |
| Teplota kolonky | 30°C |
| Doba běhu | 60 min |
Gradientní program
| Čas (min) | %A (voda) | %B (methanol) |
|---|---|---|
| 0 | 95 | 5 |
| 5 | 90 | 10 |
| 15 | 80 | 20 |
| 25 | 70 | 30 |
| 35 | 60 | 40 |
| 45 | 40 | 60 |
| 50 | 20 | 80 |
| 55 | 5 | 95 |
| 60 | 95 | 5 |
Detekční vlnové délky
| Třídění sloučenin | λmax (nm) | Kvantifikace při |
|---|---|---|
| Hydroxyzimtské kyseliny (Chlorogenové kyseliny) | 325 | 330 nm |
| Flavonoly (Kvercetin, Kaempferol) | 365 | 360 nm |
| Katechiny | 280 | 280 nm |
| Kofein | 272 | 272 nm |
| Antokyany (pokud jsou přítomny) | 520 | 520 nm |
Kalibrace
Externí kalibrace s normovanými látkami:
| Standard | Rozsah koncentrací (μg/mL) | R² | Linearita |
|---|---|---|---|
| Chlorogenová kyselina (5-CQA) | 1-100 | 0,9998 | Vynikající |
| Rutin (Quercetin-3-O-rutinosid) | 0,5-50 | 0,9996 | Vynikající |
| Epikatechin | 0,5-50 | 0,9992 | Vynikající |
| Kofein | 5-500 | 0,9999 | Vynikající |
HPLC-DAD-ESI/MSn für Strukturaufklärung
Kombinace HPLC s hmotnostní spektrometrií umožňuje identifikaci neznámých sloučenin pomocí fragmentačních vzorů.
MS parametry (García-Ruiz et al. 2017)
| Parametr | Hodnota |
|---|---|
| Hmotnostní spektrometr | Agilent Ion Trap (G2445A) |
| Ionizace | Elektrospray (ESI) |
| Režim | Negativní ionizace |
| Teplota kapiláry | 350°C |
| Napětí kapiláry | 4 kV |
| Tlak nebulizéru | 65 psi |
| N₂-průtok | 11 L/min |
| Skener oblast | m/z 100-1200 |
| Količní plyn | Helium |
| Količní energie | 0,3-2,0 V (rampování) |
Příklad: Identifikace quercetinu-3-O-hexosidu
- Retenční čas: 32,4 min
- UV spektrum: λmax 256, 355 nm (typické pro flavonol)
- [M-H]⁻: m/z 463
- MS² (463): m/z 301 [M-H-162]⁻ (ztráta hexózy)
- MS³ (301): m/z 179, 151 (typický fragmentační vzor kvercetinu)
- Identifikace: Kvercetin-3-O-glukosid nebo -galaktosid
Charakteristické fragmentace
| Třídění sloučenin | Charakteristické ztráty neutrálních částic | Typické fragmenty |
|---|---|---|
| Chlorogenové kyseliny | -162 (chinová kyselina), -176 (kávová kyselina) | m/z 191 (chinová kyselina), 179 (kávová kyselina) |
| Quercetin-glykosidy | -162 (hexóza), -146 (ramnóza), -308 (rutinosid) | m/z 301 (quercetin-aglykon) |
| Kaempferol-glykosidy | -162 (hexóza), -146 (ramnóza) | m/z 285 (Kaempferol-aglykon) |
| Katechiny | -152 (gallát) | m/z 289 (epikatechin), 139 (gallová kyselina) |
LC-MS/MS metody (Triple Quadrupole)
Pro vysoce citlivou kvantifikaci alkaloidů a saponinů se používá LC-MS/MS s trojitými kvadrupólovými hmotnostními spektrometry v režimu Multiple Reaction Monitoring (MRM).
Kvantifikace kofeinu (Krieger et al. 2016)
LC parametry
| Parametr | Hodnota |
|---|---|
| Sloupec | Acquity UPLC BEH C18 (50 mm × 2,1 mm, 1,7 μm) |
| Mobilní fáze A | 0,1% kyseliny mravenčí ve vodě |
| Mobilní fáze B | 0,1% mravenčí kyseliny v acetonitrilu |
| Průtoková rychlost | 0,4 mL/min |
| Objem injekce | 5 μL |
| Doba běhu | 5 min |
MS/MS parametry (MRM režim)
| Analyt | Prekurzorový ion (m/z) | Produktový ion (m/z) | Energie kolize (eV) | LOQ (ng/mL) |
|---|---|---|---|---|
| Kofein | 195,1 [M+H]⁺ | 138,1 (kvantifikátor) | 20 | 5 |
| Kofein | 195,1 [M+H]⁺ | 110,1 (kvalifikátor) | 25 | - |
| Teobromin | 181,1 [M+H]⁺ | 138,1 | 18 | 10 |
| Paraxanthin (IS) | 181,1 [M+H]⁺ | 124,1 | 22 | - |
Validace metod
| Parametr | Kofein | Teobromin |
|---|---|---|
| Linearita (R²) | 0,9998 | 0,9995 |
| LOD (ng/mL) | 1,5 | 3,0 |
| LOQ (ng/mL) | 5,0 | 10,0 |
| Intra-denní přesnost (RSD%) | 2,8 | 4,1 |
| Inter-denní přesnost (RSD%) | 4,2 | 5,9 |
| Obnova (%) | 97,3 ± 3,1 | 94,8 ± 4,5 |
| Efekt matice (%) | -8,2 | -12,5 |
Analýza saponinů (Chianese et al. 2019)
Triterpensaponiny vyžadují speciální ionizační podmínky a fragmentační strategie.
MRM přechody pro Ilexsaponiny
| Saponin | [M-H]⁻ (m/z) | Hlavní fragment (m/z) | CE (eV) |
|---|---|---|---|
| Ilexsaponin A | 927,5 | 455,3 (Aglykon) | 35 |
| Ilexsaponin B | 911,5 | 455,3 (Aglykon) | 35 |
| Ursolová kyselina | 455,3 | 407,3 [M-H-CO₂]⁻ | 25 |
| Oleanolová kyselina | 455,3 | 407,3 [M-H-CO₂]⁻ | 25 |
GC-MS pro těkavé sloučeniny
Plynová chromatografie-hmotnostní spektrometrie se používá pro analýzu volatilních aromatických složek v guayuse.
Headspace-SPME-GC-MS
SPME podmínky
- Vlákno: DVB/CAR/PDMS (50/30 μm, Supelco)
- Teplota vzorku: 60°C
- Doba extrakce: 30 min
- Desorpce: 250°C, 3 min v GC injektoru
GC-MS parametry
| Parametr | Hodnota |
|---|---|
| Sloupec | DB-5MS (30 m × 0,25 mm, 0,25 μm) |
| Nosný plyn | Helium, 1,0 mL/min (konstantní) |
| Teplota injektoru | 250°C |
| Režim injekce | Bez rozdělení |
| Program pece | 40°C (3 min) → 5°C/min → 250°C (5 min) |
| Přenosová linka | 280°C |
| Iontový zdroj | EI, 70 eV, 230°C |
| Skener oblast | m/z 35-350 |
Identifikované těkavé sloučeniny
| Sloučenina | RT (min) | Relativní četnost (%) | Vůně |
|---|---|---|---|
| Linalool | 18,3 | 12,4 | Květinový, citrusový |
| α-Terpineol | 19,7 | 8,2 | Syringa, dřevnatý |
| Geraniol | 21,2 | 6,5 | Růžovitý |
| β-Ionon | 28,4 | 5,1 | Fialkový, dřevnatý |
| Hexanal | 8,9 | 4,8 | Trávový, zelený |
| (E)-2-Hexenal | 10,2 | 3,9 | Zelený, listový |
Spektroskopické metody
UV-Vis spektrofotometrie
Folin-Ciocalteu metoda (Celkový fenolický obsah)
Kolorimetrische Bestimmung des Gesamtpolyphenolgehalts.
Protokol
- 0,5 mL extraktu (nebo standardu) do 15 mL zkumavky
- Přidat 2,5 mL Folin-Ciocalteu činidla (1:10 naředit)
- Inkubační doba 2 min při RT
- Přidat 2 mL roztoku Na₂CO₃ (75 g/L), promíchat
- Inkubační doba 15 min při 50°C
- Ochladit na RT
- Měřit absorbanci při 750 nm
Kalibrace
- Standard: kyselina gallová
- Rozsah koncentrací: 10-90 mg/L
- Linearita (R²): 0,9997
- Výsledek: mg ekvivalentů kyseliny gallové (GAE) / g sušiny
NMR spektroskopie
Jádrová rezonanční spektroskopie pro strukturální objasnění izolovaných sloučenin.
Standardní podmínky
| Parametr | ¹H-NMR | ¹³C-NMR |
|---|---|---|
| Frekvence | 600 MHz | 150 MHz |
| rozpouštědlo | CD₃OD, DMSO-d₆ | CD₃OD, DMSO-d₆ |
| teplota | 25°C | 25°C |
| množství vzorku | 1-5 mg | 5-20 mg |
| doba měření | 10-30 min | 2-8 h |
2D-NMR techniky
- COSY: ¹H-¹H korelace
- HSQC: ¹H-¹³C korelace (1 vazba)
- HMBC: ¹H-¹³C korelace (2-3 vazby)
- NOESY: prostorová blízkost protonů
Antioxidantní kapacita
ORAC (Kapacita absorpce kyslíkových radikálů)
Fluorescenční metoda pro měření antioxidační kapacity.
Protokol (96-jamková mikrodeska)
- Příprava činidel:
- Fluorescein: 1 μM in Phosphatpuffer (pH 7,4)
- AAPH: 250 mM v fosfátovém pufru
- Trolox standardy: 10-200 μM
- Schéma pipetování:
- 150 μL Fluorescein in jedes Well
- 25 μL vzorek/standard/blank
- Inkubační doba 15 min při 37°C
- Přidat 25 μL AAPH (zahájení reakce)
- Měření:
- Fluoreszenz alle 2 min für 120 min
- Excitace: 485 nm, emise: 520 nm
- Teplota: 37°C
- Výpočet:
- AUC (Area Under Curve) für jede Probe
- Čistá AUC = AUC_vzorek - AUC_blank
- Výsledek: μmol Trolox-ekvivalentů / g
Typické ORAC hodnoty
| Vzorek | ORAC (μmol TE/g DW) |
|---|---|
| Guayusa (čerstvá) | 127,8 ± 8,3 |
| Guayusa (fermentovaná) | 101,2 ± 7,1 |
| zelený čaj | 80-100 |
| Yerba Mate | 90-120 |
DPPH assay
Schnelle spektrophotometrische Methode.
Mikrodeskový protokol
- 250 μL DPPH roztoku (v methanolu) do každé jamky
- Přidat 2 μL vzorku/standartu
- Inkubovat 50 min při RT ve tmě
- Měřit absorbanci při 515 nm
- Výpočet: % inhibice = [(A_blank - A_vzorek) / A_blank] × 100
FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power)
Misst die Reduktionskraft von Antioxidantien.
FRAP-reagens
- Acetátový pufr (300 mM, pH 3,6): 25 mL
- TPTZ (10 mM v 40 mM HCl): 2,5 mL
- FeCl₃·6H₂O (20 mM): 2,5 mL
- Čerstvě smíchat před použitím, ohřát na 37°C
Provádění
- 10 μL vzorku + 300 μL FRAP činidla
- Inkubovat 4 min při 37°C
- Měřit absorbanci při 593 nm
- Kalibrace s FeSO₄ (100-1000 μM)
- Výsledek: μmol Fe²⁺-ekvivalentů / g
Validace metod
Validierung analytischer Methoden nach ICH Q2(R1) Richtlinien.
Parametry validace
1. Specifičnost/selektivita
- Důkaz, že metoda měří pouze cílový analyzovaný prvek
- Žádné interference ze strany matrice nebo jiných sloučenin
- Test: analýza prázdného, standardního a vzorku; kontrola čistoty píku
2. Linearita
| Kritérium | Požadavek | Guayusa metody |
|---|---|---|
| koeficient korelace (R²) | ≥ 0,995 | 0,9992-0,9999 |
| Počet kalibračních bodů | ≥ 5 | 6-8 |
| Rozsah koncentrace | 80-120% cílové koncentrace | 50-150% |
| Zbytky | Náhodně rozloženo | ✓ |
3. Přesnost
| Typ | Podmínky | Požadavek RSD | Data Guayusa |
|---|---|---|---|
| Opakovací přesnost | Stejný den, stejný analytik | < 5% | 1,2-4,6% |
| Mezilehlá přesnost | Různé dny | < 10% | 3,3-5,9% |
| Reprodukovatelnost | Různé laboratoře | < 15% | Nebylo testováno |
4. Správnost (Accuracy)
- Obnova: 90-110% (pro hlavní složky)
- Metoda: experimenty s obnovou spike
- Guayusa-data: 88,5-98,7%
5. Mez detekce a stanovení
| Parametr | Definice | Výpočet |
|---|---|---|
| LOD (Limit detekce) | Nejmenší detekovatelná množství | 3,3 × σ / S |
| LOQ (Limit kvantifikace) | Nejmenší kvantifikovatelné množství | 10 × σ / S |
σ = standardní odchylka odpovědi, S = sklon kalibrační křivky
6. Robustnost
Nesenzitivita metody vůči malým variacím:
- pH hodnoty mobilní fáze (±0,2)
- Průtok (±10%)
- Teplota sloupce (±5°C)
- Vlnová délka (±2 nm)
- Různé sloupce (stejný typ, různé šarže)
7. Stabilita
| Typ stability | Podmínky | Výsledky Guayusa |
|---|---|---|
| Stabilita autosamplera | 4°C, 48 h | Stabilní (<5% rozklad) |
| Stabilita na pracovní desce | RT, 6 h | Polyfenoly: -8%, Kofein: stabilní |
| Stabilita zmrazení a rozmrazení | 3 cykly | Stabilní (<10% rozklad) |
| Dlouhodobá stabilita | -20°C, 6 měsíců | Stabilní (<10% rozklad) |
Kontrola kvality
Zajištění kvality dat prostřednictvím systematických QC opatření.
QC vzorky
| Typ QC | Koncentrace | Frekvence | Akceptační kritérium |
|---|---|---|---|
| Prázdný | 0 | Každá sekvence (začátek) | Žádné vrcholy při Analyt-RT |
| LLOQ (Dolní LOQ) | LOQ | Každá sekvence | 80-120% nominální koncentrace |
| QC Nízký | 3 × LOQ | Všechny 10 vzorků | 85-115% |
| QC Střední | Střed oblasti | Všechny 10 vzorků | 85-115% |
| QC Vysoký | 80% horního limitu | Všechny 10 vzorků | 85-115% |
Test vhodnosti systému (SST)
Provést před každou sekvencí:
| Parametr | Požadavek | Výpočet |
|---|---|---|
| Reprodukovatelnost retenční doby | RSD < 1% | 6 injekcí standardu |
| Reprodukovatelnost plochy vrcholu | RSD < 2% | 6 injekcí standardu |
| Rozlišení (Rs) | > 1,5 | Rs = 2(tR2 - tR1) / (w1 + w2) |
| Tailing faktor (Tf) | < 2,0 | Tf = (a + b) / 2a |
| Teoretický počet základů (N) | > 2000 | N = 16 (tR / w)² |
Dokumentace
- Příprava vzorků: Protokol s datem, analytik, čísla šarží
- Deník zařízení: Údržba, výměna sloupců, problémy
- Kalibrační křivky: Rovnice, R², reziduální graf
- QC-grafy: Diagramy Levey-Jennings pro sledování trendů
- Out-of-Specification (OOS): Dokumentace a vyšetřování odchylek
Referenční materiály
| Standard | Čistota | Zdroj | Skladování |
|---|---|---|---|
| Kofein | ≥ 99% | Sigma-Aldrich | RT, suchý |
| Chlorogenová kyselina (5-CQA) | ≥ 95% | Sigma-Aldrich | -20°C, suchý |
| Rutin | ≥ 94% | Sigma-Aldrich | -20°C, suchý |
| Epikatechin | ≥ 98% | Sigma-Aldrich | -20°C, suchý |
| Trolox | ≥ 97% | Fluka | RT, suchý |
Nejnovější metodika a studie (2024–2026)
Novější práce (2024–2026) zlepšily hlavně workflowy a "zelené" zpracování: profilování chlorogenových kyselin, necílenou metabolomiku a extrakční/čisticí techniky.
- Metodika: Workflow pro chlorogenové kyseliny (J Chromatogr A 2026, PMID: 41604851): HPLC‑UV (5‑CQA) + LC‑MS/MS, feature-based molecular networking a Chemometrie.
- Metodika: Necílená metabolomika (Food Chemistry 2026, PMID: 41643380): GC‑EI‑MS, 205 metabolitů; stáří listů a světlo jako klíčové faktory.
- Zpracování/metodika: Supercritical antisolvent (Molecules 2024, PMID: 39598698): chlorogenové kyseliny koncentrovány, Kofein selektivně <1 % m/m; enkapsulace s PVP.
- V tisku: Udržitelná extrakce se stlačenými fluidy (DOI: 10.1016/j.supflu.2025.106801).
- V tisku: Subkritická vodní extrakce pro funkční ingredience (DOI: 10.1016/j.scp.2026.102338).
Garzón, T., et al. (2026)
Integrated HPLC-UV validation and LC-MS/MS optimization with molecular networking Výpočetní přístup (např. GNPS), který propojuje MS/MS spektra podle podobnosti. Umožňuje odhalovat rodiny příbuzných sloučenin a podporuje anotaci. Botanický rod cesmíny s přibližně 400-600 druhy po celém světě. K tomuto rodu patří Ilex guayusa, Ilex paraguariensis (mate) a Ilex vomitoria (yaupon).molecular networking
Ilex
PMID: 41604851. DOI: 10.1016/j.chroma.2026.466732
- Design: Workflow: validace HPLC‑UV pro 5‑CQA + optimalizované UPLC‑MS/MS (FastDDA) se sloučením surových dat; feature-based molecular networking a Chemometrie (PCA/volcano/HCA).
- Hlavní zjištění: LOQ 0,25 mg/L a r²≈0,998 pro 5‑CQA. Sloučení surových dat zvýšilo počet features o 43%. Nejsilnější driver rozdílů: geografická lokalita, poté světlo a stáří rostliny.
- Poznámky: Důsledek pro QC: kombinovat cílený marker (např. 5‑CQA) s necíleným profilováním/Networking; dokumentovat původ, světlo/stín a stáří pro porovnání šarží.
Pastuña-Fasso, J.V., et al. (2026)
Influence of plant age and sunlight exposure on the volatile profile and metabolomic pathways of Ilex guayusa leaves used in the traditional Amazonian beverage
PMID: 41643380. DOI: 10.1016/j.foodchem.2026.148238
- Design: Necílená metabolomika vodných extraktů (GC‑EI‑MS); anotace metabolitů pomocí MZmine, MS‑DIAL, eRah a MSHub/GNPS; porovnání stáří rostliny a světlo vs stín.
- Hlavní zjištění: Anotováno 205 metabolitů; fenoly vyšší na světle, lipidy převažovaly ve stínu; mapování drah ukázalo vlivy na fenylpropanoidy, metabolismus tyrosinu a degradaci mastných kyselin.
- Poznámky: Podporuje, že pěstební parametry (stáří, zastínění) jsou analyticky viditelné. Pro standardizaci je vhodné je kontrolovat nebo alespoň dokumentovat.
Meneses, M.Á., et al. (2024)
Green Processing of Ilex guayusa: Antioxidant Concentration and Caffeine Reduction Using Encapsulation by Supercritical Antisolvent Process
PMID: 39598698. DOI: 10.3390/molecules29225309
- Design: Supercritical antisolvent (SAE) pro frakcionaci: ethanolem extrakt, 80–150 bar při 35–45°C; koprecipitace/enkapsulace s PVP (1:1 až 1:2 m/m).
- Hlavní zjištění: Optimalizace (120 bar/45°C): chlorogenové kyseliny 43,02 → 237 mg/g; Kofein selektivně <1 % m/m; PVP zvýšilo výtěžek (>2×) a podpořilo tvorbu mikročástic.
- Poznámky: Relevance: „zelené“ zpracování umožňuje kofeinově chudé, polyfenolově bohaté guayusa ingredience. Pro analytiku důležité, protože takové produkty nejsou srovnatelné s klasickým nálevem listů.
In press (2026)
Towards sustainable extraction of bioactive compounds from guayusa (Ilex guayusa): A comparative study on compressed fluids’ performance
DOI: 10.1016/j.supflu.2025.106801
- Design: V tisku: srovnání výkonu stlačených fluid (compressed fluids) pro udržitelnou extrakci bioaktivních látek z guayusy.
- Hlavní zjištění: Podle názvu: srovnává procesní výkon. Detaily (výtěžek/selektivita/metryky) jsou v článku.
- Poznámky: Bez volně dostupného abstraktu: pouze opatrná, názvem podložená klasifikace. Parametry a KPI doplníme po zpřístupnění.
In press (2026)
Subcritical water extraction of Ilex guayusa for regulatory-compliant neuro-metabolic functional ingredients
DOI: 10.1016/j.scp.2026.102338
- Design: V tisku: subkritická vodní extrakce guayusy pro výrobu funkčních ingrediencí vyhovujících regulaci.
- Hlavní zjištění: Podle názvu: subkritická voda jako „zelené“ rozpouštědlo a důraz na regulatorní shodu; konkrétní parametry viz článek.
- Poznámky: Bez volného abstraktu: pouze rámcová klasifikace dle názvu. Detaily doplníme, jakmile budou dostupné.
Wichtige Literatur für Analytiker
- García-Ruiz, A., et al. (2017). Guayusa (Ilex guayusa L.) new tea: phenolic and carotenoid composition and antioxidant capacity. J Sci Food Agric, 97(12), 3929-3936. [Umfassende HPLC-DAD-ESI/MSn-Methode]
- Krieger, D.R., et al. (2016). The safety, pharmacokinetics, and nervous system effects of two natural sources of caffeine. Clin Transl Sci, 9(5), 246-251. [LC-MS/MS für Koffein-Pharmakokinetik]
- Stinco, C.M., et al. (2016). RRLC-DAD-APCI-MS analysis of carotenoids. Food Chem, 211, 876-883. [Carotinoid-Analytik]
- Chianese, G., et al. (2019). Phytochemical analysis of Ilex guayusa. Il Farmaco, 74(1), 85-93. [Saponin-Charakterisierung mit NMR und MS]
- ICH Q2(R1). (2005). Validace analytických postupů: Text a metodologie. [Pokyny k validaci]
Objevte GUYA
Zažijte autentickou Guayusu z Ekvádoru s transparentním dodavatelským řetězcem a přímou podporou komunit Kichwa.
K GUYA - drinkguya.com →