Analytische Methoden

Umfassende methodische Details zur phytochemischen Analyse von Ilex guayusa

für Fachpublikum

Kurzfazit

Das Wichtigste auf einen Blick:

Übersicht
Probenvorbereitung
HPLC

HPLC

High-Performance Liquid Chromatography - Standardmethode zur quantitativen Analyse von Polyphenolen und Alkaloiden in Guayusa. Typische Methode: C18-Säule, Acetonitril-Gradient, UV-Detektion bei 280 nm.
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-Methoden
LC-MS/MS

LC-MS/MS

Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry - Hochsensitive Methode zur Identifikation und Quantifizierung von Sekundärmetaboliten. Wird für Saponin- und Polyphenol-Analyse in Guayusa verwendet.
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GC-MS

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Gaschromatographie-Massenspektrometrie - Analytische Methode zur Identifikation flüchtiger Verbindungen. Wird zur Analyse von Aromastoffen in Guayusa verwendet.
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für flüchtige Verbindungen

Diese Seite richtet sich an Wissenschaftler, Analytiker und Fachpersonal. Sie enthält detaillierte methodische Informationen zur Analyse von Guayusa-Inhaltsstoffen.

Übersicht der analytischen Methoden

Die phytochemische Charakterisierung von Ilex guayusa erfordert eine Kombination verschiedener analytischer Techniken. Die Wahl der Methode hängt von der Zielverbindung, der Matrix und der erforderlichen Sensitivität ab.

Methode	Zielverbindungen	LOD	Analysendauer	Kosten
HPLC-DAD	Polyphenole, Koffein	0,1-1 μg/mL	30-60 min	€€
HPLC-DAD-ESI/MSn	Polyphenole (Strukturaufklärung)	0,01-0,1 μg/mL	45-90 min	€€€
LC-MS/MS (QqQ)	Alkaloide, Saponine	0,001-0,01 μg/mL	15-30 min	€€€€
GC-MS	Flüchtige Verbindungen	0,01-0,1 ng/mL	30-45 min	€€€
UV-Vis Spektroskopie	Gesamtpolyphenole (TPC)	1-10 μg/mL	5-10 min	€
NMR	Strukturaufklärung	1-10 mg	1-4 h	€€€€€

Probenvorbereitung

Die Probenvorbereitung ist kritisch für reproduzierbare und genaue Ergebnisse. Guayusa-Blätter enthalten hohe Konzentrationen an Polyphenolen, die oxidationsempfindlich sind.

Standardprotokoll für Polyphenol-Analyse (García-Ruiz et al. 2017)

Materialien

Gefriergetrocknete Guayusa-Blätter (gemahlen, <0,5 mm)
Extraktionslösung: Methanol/Wasser (70:30, v/v) + 1% Ameisensäure
0,45 μm PVDF-Filter (Millex HV13, Millipore)
Ultraschallbad (40 kHz)
Zentrifuge (9.500 × g)

Protokoll

Einwaage: 100 mg gefriergetrocknetes Pulver in 15 mL Falcon-Röhrchen
Extraktion 1: 1 mL Extraktionslösung zugeben, vortexen (30 s)
Ultraschall 1: 60 min bei Raumtemperatur im Ultraschallbad
Inkubation: Über Nacht bei 4°C
Ultraschall 2: Erneut 60 min im Ultraschallbad
Zentrifugation: 9.500 × g, 5 min, Raumtemperatur
Filtration: Überstand durch 0,45 μm PVDF-Filter
Lagerung: Bei 4°C im Dunkeln, max. 48 h vor Analyse

Wiederfindungsraten

Verbindungsklasse	Wiederfindung (%)	RSD (%)
Chlorogensäuren	94,2 ± 3,1	3,3
Flavonole	91,8 ± 4,2	4,6
Catechine	88,5 ± 5,1	5,8
Koffein	98,7 ± 1,2	1,2

Carotinoid-Extraktion (Stinco et al. 2016)

Protokoll

Einwaage: 10 mg gefriergetrocknetes Pulver
Entfernung von Wasser: 1 mL MilliQ-Wasser, vortexen, zentrifugieren (18.000 × g, 3 min), verwerfen
Extraktion 1: 1 mL Hexan/Aceton (1:1, v/v), vortexen, zentrifugieren (18.000 × g, 3 min)
Extraktion 2: 500 μL Hexan/Aceton, vortexen, zentrifugieren
Vereinigung: Organische Phasen vereinigen
Verseifung: Methanolisches KOH (30 g/100 mL), 1 h bei RT im Dunkeln
Waschen: Mit Wasser bis pH neutral
Eindampfen: Vakuumkonzentrator, <30°C
Lösen: In 100 μL Ethylacetat
Lagerung: Unter N₂ bei -20°C

Kritische Faktoren

Oxidation: Polyphenole oxidieren schnell → Ameisensäure als Antioxidans, Lagerung bei 4°C im Dunkeln
Licht: Carotinoide sind photolabil → Arbeit im Dämmerlicht, Bernsteinglas
Temperatur: Enzyme können Polyphenole abbauen → Gefriertrocknung oder sofortige Extraktion
pH-Wert: Beeinflusst Stabilität und Extraktion → pH 2-3 optimal für Polyphenole

HPLC-Methoden

HPLC-DAD für Quantifizierung

High Performance Liquid Chromatography mit Dioden-Array-Detektor text_563 ist die Standardmethode für die Quantifizierung von Polyphenolen und Koffein.

Geräteaufbau (García-Ruiz et al. 2017)

System: Agilent 1220 Infinity LC
Pumpe: Binäre Gradientenpumpe
Autosampler: Injektionsvolumen 20 μL
Säulenofen: 30°C
Detektor: DAD, 200-600 nm

Chromatographische Bedingungen

Parameter	Wert
Säule	Luna C18 (25 cm × 4,6 mm, 5 μm, Phenomenex)
Vorsäule	C18, 4 × 3 mm
Mobile Phase A	Wasser + 0,1% Ameisensäure
Mobile Phase B	Methanol + 0,1% Ameisensäure
Flussrate	1,0 mL/min
Injektionsvolumen	20 μL
Säulentemperatur	30°C
Laufzeit	60 min

Gradientenprogramm

Zeit (min)	%A (Wasser)	%B (Methanol)
0	95	5
5	90	10
15	80	20
25	70	30
35	60	40
45	40	60
50	20	80
55	5	95
60	95	5

Detektionswellenlängen

Verbindungsklasse	λmax (nm)	Quantifizierung bei
Hydroxyzimtsäuren (Chlorogensäuren)	325	330 nm
Flavonole (Quercetin, Kaempferol)	365	360 nm
Catechine	280	280 nm
Koffein	272	272 nm
Anthocyane (falls vorhanden)	520	520 nm

Kalibrierung

Externe Kalibrierung mit Standardsubstanzen:

Standard	Konzentrationsbereich (μg/mL)	R²	Linearität
Chlorogensäure (5-CQA)	1-100	0,9998	Ausgezeichnet
Rutin (Quercetin-3-O-rutinosid)	0,5-50	0,9996	Ausgezeichnet
Epicatechin	0,5-50	0,9992	Ausgezeichnet
Koffein	5-500	0,9999	Ausgezeichnet

HPLC-DAD-ESI/MSn für Strukturaufklärung

Kopplung von HPLC mit Massenspektrometrie ermöglicht die Identifizierung unbekannter Verbindungen durch Fragmentierungsmuster.

MS-Parameter (García-Ruiz et al. 2017)

Parameter	Wert
Massenspektrometer	Agilent Ion Trap (G2445A)
Ionisierung	Elektrospray (ESI)
Modus	Negativ-Ionisation
Kapillartemperatur	350°C
Kapillarspannung	4 kV
Nebulizer-Druck	65 psi
N₂-Flussrate	11 L/min
Scan-Bereich	m/z 100-1200
Kollisionsgas	Helium
Kollisionsenergie	0,3-2,0 V (ramping)

Beispiel: Identifizierung von Quercetin-3-O-hexosid

Retentionszeit: 32,4 min
UV-Spektrum: λmax 256, 355 nm (typisch für Flavonol)
[M-H]⁻: m/z 463
MS² (463): m/z 301 [M-H-162]⁻ (Verlust von Hexose)
MS³ (301): m/z 179, 151 (typisches Quercetin-Fragmentierungsmuster)
Identifizierung: Quercetin-3-O-glucosid oder -galactosid

Charakteristische Fragmentierungen

Verbindungsklasse	Charakteristische Neutralverluste	Typische Fragmente
Chlorogensäuren	-162 (Chinasäure), -176 (Kaffeeoylchinasäure)	m/z 191 (Chinasäure), 179 (Kaffeesäure)
Quercetin-Glykoside	-162 (Hexose), -146 (Rhamnose), -308 (Rutinosid)	m/z 301 (Quercetin-Aglykon)
Kaempferol-Glykoside	-162 (Hexose), -146 (Rhamnose)	m/z 285 (Kaempferol-Aglykon)
Catechine	-152 (Gallat)	m/z 289 (Epicatechin), 139 (Gallussäure)

LC-MS/MS-Methoden (Triple Quadrupole)

Für hochsensitive Quantifizierung von Alkaloiden und Saponinen wird LC-MS/MS mit Triple-Quadrupol-Massenspektrometern im Multiple Reaction Monitoring (MRM)-Modus eingesetzt.

Koffein-Quantifizierung (Krieger et al. 2016)

LC-Parameter

Parameter	Wert
Säule	Acquity UPLC BEH C18 (50 mm × 2,1 mm, 1,7 μm)
Mobile Phase A	0,1% Ameisensäure in Wasser
Mobile Phase B	0,1% Ameisensäure in Acetonitril
Flussrate	0,4 mL/min
Injektionsvolumen	5 μL
Laufzeit	5 min

MS/MS-Parameter (MRM-Modus)

Analyt	Precursor Ion (m/z)	Product Ion (m/z)	Collision Energy (eV)	LOQ (ng/mL)
Koffein	195,1 [M+H]⁺	138,1 (Quantifier)	20	5
Koffein	195,1 [M+H]⁺	110,1 (Qualifier)	25	-
Theobromin	181,1 [M+H]⁺	138,1	18	10
Paraxanthin (IS)	181,1 [M+H]⁺	124,1	22	-

Methodenvalidierung

Parameter	Koffein	Theobromin
Linearität (R²)	0,9998	0,9995
LOD (ng/mL)	1,5	3,0
LOQ (ng/mL)	5,0	10,0
Intra-day Präzision (RSD%)	2,8	4,1
Inter-day Präzision (RSD%)	4,2	5,9
Wiederfindung (%)	97,3 ± 3,1	94,8 ± 4,5
Matrix-Effekt (%)	-8,2	-12,5

Saponin-Analyse (Chianese et al. 2019)

Triterpensaponine erfordern spezielle Ionisierungsbedingungen und Fragmentierungsstrategien.

MRM-Übergänge für Ilexsaponine

Saponin	[M-H]⁻ (m/z)	Hauptfragment (m/z)	CE (eV)
Ilexsaponin A	927,5	455,3 (Aglykon)	35
Ilexsaponin B	911,5	455,3 (Aglykon)	35
Ursolsäure	455,3	407,3 [M-H-CO₂]⁻	25
Oleanolsäure	455,3	407,3 [M-H-CO₂]⁻	25

GC-MS für flüchtige Verbindungen

Gaschromatographie-Massenspektrometrie wird für die Analyse flüchtiger Aromakomponenten in Guayusa eingesetzt.

Headspace-SPME-GC-MS

SPME-Bedingungen

Faser: DVB/CAR/PDMS (50/30 μm, Supelco)
Probentemperatur: 60°C
Extraktionszeit: 30 min
Desorption: 250°C, 3 min im GC-Injektor

GC-MS-Parameter

Parameter	Wert
Säule	DB-5MS (30 m × 0,25 mm, 0,25 μm)
Trägergas	Helium, 1,0 mL/min (konstant)
Injektortemperatur	250°C
Injektionsmodus	Splitless
Ofenprogramm	40°C (3 min) → 5°C/min → 250°C (5 min)
Transfer Line	280°C
Ionenquelle	EI, 70 eV, 230°C
Scan-Bereich	m/z 35-350

Identifizierte flüchtige Verbindungen

Verbindung	RT (min)	Relative Häufigkeit (%)	Geruchsnote
Linalool	18,3	12,4	Blumig, zitrusartig
α-Terpineol	19,7	8,2	Flieder, holzig
Geraniol	21,2	6,5	Rosenartig
β-Ionon	28,4	5,1	Veilchen, holzig
Hexanal	8,9	4,8	Grasig, grün
(E)-2-Hexenal	10,2	3,9	Grün, blattartig

Spektroskopische Methoden

UV-Vis Spektrophotometrie

Folin-Ciocalteu-Methode (Total Phenolic Content)

Kolorimetrische Bestimmung des Gesamtpolyphenolgehalts.

Protokoll

0,5 mL Extrakt (oder Standard) in 15 mL Röhrchen
2,5 mL Folin-Ciocalteu-Reagenz (1:10 verdünnt) zugeben
2 min bei RT inkubieren
2 mL Na₂CO₃-Lösung (75 g/L) zugeben, mischen
15 min bei 50°C inkubieren
Abkühlen auf RT
Absorbanz bei 750 nm messen

Kalibrierung

Standard: Gallussäure
Konzentrationsbereich: 10-90 mg/L
Linearität (R²): 0,9997
Ergebnis: mg Gallussäure-Äquivalente (GAE) / g Trockengewicht

NMR-Spektroskopie

Kernresonanzspektroskopie für Strukturaufklärung isolierter Verbindungen.

Standardbedingungen

Parameter	¹H-NMR	¹³C-NMR
Frequenz	600 MHz	150 MHz
Lösungsmittel	CD₃OD, DMSO-d₆	CD₃OD, DMSO-d₆
Temperatur	25°C	25°C
Probenmenge	1-5 mg	5-20 mg
Messzeit	10-30 min	2-8 h

2D-NMR-Techniken

COSY: ¹H-¹H-Korrelationen
HSQC: ¹H-¹³C-Korrelationen (1 Bond)
HMBC: ¹H-¹³C-Korrelationen (2-3 Bonds)
NOESY: Räumliche Nähe von Protonen

Antioxidative Kapazität

ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity)

Fluoreszenz-basierte Methode zur Messung der antioxidativen Kapazität.

Protokoll (96-Well-Mikroplatte)

Reagenzien vorbereiten:
- Fluorescein: 1 μM in Phosphatpuffer (pH 7,4)
- AAPH: 250 mM in Phosphatpuffer
- Trolox-Standards: 10-200 μM
Pipettierschema:
- 150 μL Fluorescein in jedes Well
- 25 μL Probe/Standard/Blank
- Inkubation 15 min bei 37°C
- 25 μL AAPH zugeben (Start der Reaktion)
Messung:
- Fluoreszenz alle 2 min für 120 min
- Anregung: 485 nm, Emission: 520 nm
- Temperatur: 37°C
Berechnung:
- AUC (Area Under Curve) für jede Probe
- Net AUC = AUC_Probe - AUC_Blank
- Ergebnis: μmol Trolox-Äquivalente / g

Typische ORAC-Werte

Probe	ORAC (μmol TE/g DW)
Guayusa (frisch)	127,8 ± 8,3
Guayusa (fermentiert)	101,2 ± 7,1
Grüner Tee	80-100
Yerba Mate	90-120

DPPH-Assay

Schnelle spektrophotometrische Methode.

Mikroplatten-Protokoll

250 μL DPPH-Lösung (in Methanol) in jedes Well
2 μL Probe/Standard zugeben
50 min bei RT im Dunkeln inkubieren
Absorbanz bei 515 nm messen
Berechnung: % Inhibition = [(A_Blank - A_Probe) / A_Blank] × 100

FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power)

Misst die Reduktionskraft von Antioxidantien

FRAP-Reagenz

Acetatpuffer (300 mM, pH 3,6): 25 mL
TPTZ (10 mM in 40 mM HCl): 2,5 mL
FeCl₃·6H₂O (20 mM): 2,5 mL
Frisch vor Gebrauch mischen, auf 37°C erwärmen

Durchführung

10 μL Probe + 300 μL FRAP-Reagenz
4 min bei 37°C inkubieren
Absorbanz bei 593 nm messen
Kalibrierung mit FeSO₄ (100-1000 μM)
Ergebnis: μmol Fe²⁺-Äquivalente / g

Methodenvalidierung

Validierung analytischer Methoden nach ICH Q2(R1) Richtlinien.

Validierungsparameter

1. Spezifität/Selektivität

Nachweis, dass die Methode nur den Zielanalyten misst
Keine Interferenzen durch Matrix oder andere Verbindungen
Test: Analyse von Blank, Standard, Probe; Peak-Reinheit prüfen

2. Linearität

Kriterium	Anforderung	Guayusa-Methoden
Korrelationskoeffizient (R²)	≥ 0,995	0,9992-0,9999
Anzahl Kalibrationspunkte	≥ 5	6-8
Konzentrationsbereich	80-120% der Zielkonzentration	50-150%
Residuen	Zufällig verteilt	✓

3. Präzision

Typ	Bedingungen	RSD-Anforderung	Guayusa-Daten
Wiederholpräzision	Gleicher Tag, gleicher Analyst	< 5%	1,2-4,6%
Intermediate Präzision	Verschiedene Tage	< 10%	3,3-5,9%
Reproduzierbarkeit	Verschiedene Labore	< 15%	Nicht getestet

4. Richtigkeit (Accuracy)

Wiederfindung: 90-110% (für Hauptkomponenten)
Methode: Spike-Recovery-Experimente
Guayusa-Daten: 88,5-98,7%

5. Nachweis- und Bestimmungsgrenze

Parameter	Definition	Berechnung
LOD (Limit of Detection)	Kleinste detektierbare Menge	3,3 × σ / S
LOQ (Limit of Quantification)	Kleinste quantifizierbare Menge	10 × σ / S

σ = Standardabweichung der Response, S = Steigung der Kalibrationskurve

6. Robustheit

Unempfindlichkeit der Methode gegenüber kleinen Variationen:

pH-Wert der mobilen Phase (±0,2)
Flussrate (±10%)
Säulentemperatur (±5°C)
Wellenlänge (±2 nm)
Verschiedene Säulen (gleicher Typ, verschiedene Chargen)

7. Stabilität

Stabilitätstyp	Bedingungen	Guayusa-Ergebnisse
Autosampler-Stabilität	4°C, 48 h	Stabil (<5% Abbau)
Bench-top-Stabilität	RT, 6 h	Polyphenole: -8%, Koffein: stabil
Freeze-Thaw-Stabilität	3 Zyklen	Stabil (<10% Abbau)
Langzeitstabilität	-20°C, 6 Monate	Stabil (<10% Abbau)

Qualitätskontrolle

Sicherstellung der Datenqualität durch systematische QC-Maßnahmen.

QC-Proben

QC-Typ	Konzentration	Häufigkeit	Akzeptanzkriterium
Blank	0	Jede Sequenz (Anfang)	Keine Peaks bei Analyt-RT
LLOQ (Lower LOQ)	LOQ	Jede Sequenz	80-120% der Nominalkonzentration
QC Low	3 × LOQ	Alle 10 Proben	85-115%
QC Mid	Mitte des Bereichs	Alle 10 Proben	85-115%
QC High	80% des oberen Limits	Alle 10 Proben	85-115%

System-Suitability-Test (SST)

Vor jeder Sequenz durchzuführen:

Parameter	Anforderung	Berechnung
Retentionszeit-Reproduzierbarkeit	RSD < 1%	6 Injektionen eines Standards
Peak-Flächen-Reproduzierbarkeit	RSD < 2%	6 Injektionen eines Standards
Auflösung (Rs)	> 1,5	Rs = 2(tR2 - tR1) / (w1 + w2)
Tailing-Faktor (Tf)	< 2,0	Tf = (a + b) / 2a
Theoretische Bodenzahl (N)	> 2000	N = 16 (tR / w)²

Dokumentation

Probenvorbereitung: Protokoll mit Datum, Analyst, Chargennummern
Gerätelogbuch: Wartung, Säulenwechsel, Probleme
Kalibrationskurven: Gleichung, R², Residuen-Plot
QC-Charts: Levey-Jennings-Diagramme zur Trendüberwachung
Out-of-Specification (OOS): Dokumentation und Untersuchung von Abweichungen

Referenzmaterialien

Standard	Reinheit	Quelle	Lagerung
Koffein	≥ 99%	Sigma-Aldrich	RT, trocken
Chlorogensäure (5-CQA)	≥ 95%	Sigma-Aldrich	-20°C, trocken
Rutin	≥ 94%	Sigma-Aldrich	-20°C, trocken
Epicatechin	≥ 98%	Sigma-Aldrich	-20°C, trocken
Trolox	≥ 97%	Fluka	RT, trocken

Neueste Methodik & Studien (2024–2026)

Neuere Arbeiten (2024–2026) haben vor allem Workflows und "grüne" Verfahren verbessert: Chlorogensäuren-Profiling, Untargeted Metabolomics sowie Extraktions- und Aufreinigungstechniken.

Methodik: Chlorogensäuren-Workflow (J Chromatogr A 2026, PMID: 41604851): HPLC-UV (5-CQA) + LC-MS/MS, Feature-based Molecular Networking und Chemometrie.
Methodik: Untargeted Metabolomics (Food Chemistry 2026, PMID: 41643380): GC-EI-MS, 205 Metabolite annotiert; Blattalter und Licht als wichtige Einflussfaktoren.
Verarbeitung/Methodik: Supercritical-Antisolvent (Molecules 2024, PMID: 39598698): Chlorogensäuren konzentriert, Koffein selektiv <1% m/m; Encapsulation mit PVP.
In press: Nachhaltige Extraktion mit komprimierten Fluiden (DOI: 10.1016/j.supflu.2025.106801).
In press: Subkritische Wasserextraktion für funktionelle Inhaltsstoffe (DOI: 10.1016/j.scp.2026.102338).

Methodik

Garzón, T., et al. (2026)

Integrated HPLC-UV validation and LC-MS/MS optimization with molecular networking

and chemometrics for advanced characterization of chlorogenic acids in Ilex

Ilex

Botanische Gattung der Stechpalmen mit etwa 400-600 Arten weltweit. Zu dieser Gattung gehören Ilex guayusa, Ilex paraguariensis (Mate) und Ilex vomitoria (Yaupon).

Verwandte Themen:

Botanik Taxonomie

Mehr Infos
guayusa

PMID: 41604851. DOI: 10.1016/j.chroma.2026.466732

Setup: HPLC-UV-Validierung für 5-CQA kombiniert mit optimierter UPLC-MS/MS (FastDDA) inklusive Rohdaten-Merging; Feature-based Molecular Networking und Chemometrie (PCA/Volcano/HCA).
Hauptergebnisse: Target-Quantifizierung: LOQ 0,25 mg/L und r²≈0,998 für 5-CQA. Im Untargeted Teil erhöhte Rohdaten-Merging die Zahl detektierter Features um 43%. Wichtigste Treiber der chemischen Unterschiede: Standort, danach Licht und Pflanzenalter.
Einordnung: Praktische Konsequenz für QC: Target (z. B. 5-CQA) plus Untargeted/Networking ist robust für Chargenvergleich. Herkunft, Licht/Schattierung und Alter sollten als Metadaten erfasst werden.

Methodik

Pastuña-Fasso, J.V., et al. (2026)

Influence of plant age and sunlight exposure on the volatile profile and metabolomic pathways of Ilex guayusa leaves used in the traditional Amazonian beverage

PMID: 41643380. DOI: 10.1016/j.foodchem.2026.148238

Setup: Untargeted Metabolomics wässriger Extrakte via GC-EI-MS; Metaboliten-Annotation mit MZmine, MS-DIAL, eRah und MSHub/GNPS; Vergleich von Pflanzenalter und Licht vs. Schatten.
Hauptergebnisse: 205 Metabolite wurden annotiert (mehrere Confidence-Level). Unter Licht waren phenolische Verbindungen häufiger, im Schatten eher lipophile/lipidische Komponenten; Pathway-Mapping zeigte Effekte u. a. auf Phenylpropanoid- und Tyrosin-Metabolismus sowie Fettsäureabbau.
Einordnung: Stützt die Idee, dass Anbauparameter (Alter, Beschattung) analytisch sichtbar sind. Für Standardisierung sollte man diese Faktoren kontrollieren oder zumindest dokumentieren.

Methodik

Meneses, M.Á., et al. (2024)

Green Processing of Ilex guayusa: Antioxidant Concentration and Caffeine Reduction Using Encapsulation by Supercritical Antisolvent Process

PMID: 39598698. DOI: 10.3390/molecules29225309

Setup: Supercritical Antisolvent (SAE) zur Fraktionierung: ethanolsicher Extrakt, 80–150 bar bei 35–45°C; Co-Precipitation/Encapsulation mit PVP (1:1 bis 1:2 m/m).
Hauptergebnisse: Optimiert (120 bar/45°C) wurden Chlorogensäuren stark konzentriert (43,02 → 237 mg/g), Koffein selektiv auf <1% m/m reduziert; PVP erhöhte die Ausbeute (>2×) und begünstigte Mikropartikelbildung.
Einordnung: Relevanz: "grüne" Verarbeitung ermöglicht koffeinarme, polyphenolreiche Guayusa-Inhaltsstoffe (Ingredients). Für Analytik wichtig, weil solche Produkte nicht mit klassischem Blattaufguss vergleichbar sind.

In press

In press (2026)

Towards sustainable extraction of bioactive compounds from guayusa (Ilex guayusa): A comparative study on compressed fluids’ performance

DOI: 10.1016/j.supflu.2025.106801

Setup: In press: Vergleich der Performance komprimierter Fluide (compressed fluids) für nachhaltige Extraktion bioaktiver Guayusa-Verbindungen.
Hauptergebnisse: Fokus laut Titel: Prozess-Performance im Vergleich. Details (z. B. Ausbeute/Selektivität/Ökobilanz) sind im Artikel beschrieben.
Einordnung: Da (noch) in press und ohne frei verfügbares Abstract: Hier nur Einordnung aus Titel/Journal. Sobald Volltext/Abstract verfügbar ist, können Parameter und Kennzahlen präzise ergänzt werden.

In press

In press (2026)

Subcritical water extraction of Ilex guayusa for regulatory-compliant neuro-metabolic functional ingredients

DOI: 10.1016/j.scp.2026.102338

Setup: In press: Subkritische Wasserextraktion von Guayusa zur Gewinnung regulatorisch konformer "neuro-metabolischer" funktioneller Inhaltsstoffe.
Hauptergebnisse: Fokus laut Titel: subkritisches Wasser als "grünes" Lösungsmittel und Ausrichtung auf regulatorische Konformität. Konkrete Parameter/Targets: siehe Artikel.
Einordnung: Da (noch) in press und ohne frei verfügbares Abstract: Hier nur Einordnung aus Titel/Journal. Sobald mehr Details zugänglich sind, können Prozessfenster und Inhaltsstoff-Targets ergänzt werden.

Wichtige Literatur für Analytiker

García-Ruiz, A., et al. (2017). Guayusa (Ilex guayusa L.) new tea: phenolic and carotenoid composition and antioxidant capacity. J Sci Food Agric, 97(12), 3929-3936. [Umfassende HPLC-DAD-ESI/MSn-Methode]
Krieger, D.R., et al. (2016). The safety, pharmacokinetics, and nervous system effects of two natural sources of caffeine. Clin Transl Sci, 9(5), 246-251. [LC-MS/MS für Koffein

Koffein

Purin-Alkaloid mit stimulierender Wirkung auf das zentrale Nervensystem. Guayusa enthält 1,7-7,6% Koffein (Trockengewicht), abhängig von Sorte, Standort und Verarbeitung.

Verwandte Themen:

Alkaloide Stimulanzien

Mehr Infos
-Pharmakokinetik]
Stinco, C.M., et al. (2016). RRLC-DAD-APCI-MS analysis of carotenoids. Food Chem, 211, 876-883. [Carotinoid-Analytik]
Chianese, G., et al. (2019). Phytochemical analysis of Ilex guayusa. Il Farmaco, 74(1), 85-93. [Saponin-Charakterisierung mit NMR und MS]
ICH Q2(R1). (2005). Validation of Analytical Procedures: Text and Methodology. [Validierungsrichtlinien]

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